维生素B12对宫内发育迟缓大鼠脑损伤的干预研究

【摘要】目的：通过孕鼠孕期低蛋白（6%蛋白）饮食法制造宫内发育迟缓（IUGR）的大鼠脑损伤模型，孕期补充维生素B12，观察仔鼠体格生长规律、脑结构变化及脑组织中髓鞘碱性蛋白（MBP）的动态表达，以探讨孕期补充维生素B12对IUGR仔鼠脑损伤的影响。方法：选取健康三月龄Sprague-Dawley（SD）大鼠56只，按照雌雄1：1的比例置于同一笼中交配。受孕成功的孕鼠随机分为正常对照组（CC）和IUGR实验组（S），再按孕期是否补充维生素B12，将实验组随机分为维生素B12干预组（SV）和非干预组（SC）。对照组（CC）母鼠自受孕后第1天开始给予21%正常蛋白饮食，而IUGR组（S）母鼠自受孕后第1天开始给予6%蛋白饮食，建立IUGR模型。同时维生素B12干预组（SV）母鼠自受孕后第1天开始给予维生素B12150ug/d灌胃，直至分娩。仔鼠生后由母鼠哺乳喂养，均给予母鼠21%正常蛋白饮食喂养、自由饮水。选择生后1日龄、7日龄、14日龄和21日龄4个时间点，每个时间点每组10只仔鼠，测量仔鼠体重、头臀长及脑湿重，并对各个时间点仔鼠留取脑组织，HE染色观察海马结构的变化，免疫组化半定量测定海马组织中MBP的表达水平，取海马用Westernblot检测海马组织中髓鞘碱性蛋白（MBP)含量的动态表达，同时检测母鼠分娩当天及各个时间点仔鼠血清中维生素B12（VB12）、同型半胱氨酸（Hcy）的表达水平。结果：1、三组孕鼠所分娩的仔鼠IUGR发生率及围产期死亡率比较：与对照组（CC）相比，SV、SC组仔鼠IUGR发生率明显升高（P<0.01），而SC组、SV组仔鼠IUGR发生率无明显差异（P>0.05）。三组仔鼠围产期死亡率差异无统计学意义(P>0.05)。2、三组仔鼠体重、头臀长及脑重变化的动态比较：与对照组（CC）相比，1日龄IUGR组（SV、SC）仔鼠形体瘦小，体重、头臀长、脑湿重均降低（P<0.01），7日龄及14日龄时，SV、SC组体重、头臀长、脑湿重仍落后于CC组（P<0.05），经追赶生长，到21日龄时，SV、SC组体重、头臀长与CC组相比无明显差异（P>0.05），但脑湿重仍存在差异（P<0.05）。IUGR组中，维生素B12干预组（SV）仔鼠在1日龄、7日龄、14日龄和21日龄时体重、头臀长、脑湿重均高于非干预组（SC），但差异并不显著（P>0.05）。3、三组大鼠海马组织结构HE染色的变化：1日龄时，与对照组（CC）相比，IUGR组（S）仔鼠海马神经元细胞排列疏松、紊乱，部分细胞水肿明显，出现空泡，核固缩细胞比较多，神经元细胞数目减少。到21日龄时，IUGR组（S）细胞水肿逐步减轻，但细胞排列相对疏松、紊乱，细胞数目未见明显增多。1日龄到21日龄，与SC组比较，SV组仔鼠海马神经元细胞数目、出现空泡的细胞数目均较少，细胞排列形态相对致密、规则。4、三组大鼠海马组织中髓鞘碱性蛋白（MBP）的表达变化：三组海马组织中MBP在1日龄、7日龄时均无明显表达，从14日龄时表达逐渐增加，21日龄时最强；Westernblot检测也显示同样的表达趋势。同样，在14日龄和21日龄三组中MBP的表达，SC组表达最低，其次为SV组，CC组的表达最高。5、三组孕鼠分娩后及仔鼠血清中维生素B12（VB12）、同型半胱氨酸（Hcy）水平：三组孕鼠分娩后，SV组VB12水平高于SC、CC组（P＜0.01），SC组孕鼠VB12水平低于CC组（P＜0.01），而Hcy与VB12的表达趋势相反（P＜0.05）；随着日龄渐增加，1日龄到14日龄，各组仔鼠B12水平逐渐降低，Hcy水平逐渐升高，到21日龄时VB12下降、Hcy上升均不明显；SV组仔鼠VB12水平高于CC组、SC组（P＜0.05），SC组仔鼠VB12水平低于CC组（P＜0.05），同时仔鼠中Hcy与VB12的表达趋势相反（P＜0.05）。结论：1、孕期低蛋白（6%）喂养饮食法建立IUGR大鼠脑损伤模型，仔鼠脑重降低，海马神经元细胞数目减少、细胞排列疏松，制模可靠，效果比较理想。2、IUGR仔鼠生后予正常喂养，体格上可实现追赶生长，但神经元数目、脑重及脑组织MBP的表达落后于正常仔鼠。3、孕期补充维生素B12可提高孕鼠及仔鼠体内维生素B12水平，降低孕鼠、仔鼠体内Hcy水平。4、孕期补充维生素B12，不能降低宫内发育迟缓发生率，但有助于宫内发育迟缓仔鼠体重、头臀长和脑重的增长，神经元细胞形态的改善及脑组织MBP的表达，提示维生素B12可能对宫内发育迟缓脑损伤具有改善作用。
【作者】李文梅；
【导师】丁晓春；
【作者基本信息】苏州大学，儿科学（专业学位），2014，硕士
【关键词】宫内发育迟缓；维生素B12；脑损伤；髓鞘碱性蛋白；

【参考文献】
[1]李学忠.宁波市鄞州区农民收入结构演变轨迹与收入增长研究[D].宁波大学,农村与区域发展（专业学位）,2013,硕士.
[2]彭涛,桂卫华,DingSX,谢勇.一种故障检测滤波器的多目标优化设计方法[J].控制与决策,2005,07:773-777.
[3]杨薇.管理者过度自信对企业投资影响的实证研究[D].南京财经大学,会计学,2013,硕士.
[4]胡丹.私人武装保安抗击海盗的法律问题研究[D].大连海事大学,法律,2013,硕士.
[5]徐文学,张飞碧,刘芳,隋春立.扩声系统的音质评价[J].演艺设备与科技.2006(06)
[6]何正坤.中间覆盖层对厌氧生物反应器填埋场稳定化的影响研究[D].吉林大学,环境工程,2013,硕士.
[7]王赫男.河北省农产品冷链物流市场分析[D].河北师范大学,国际商务,2014,硕士.
[8]王萍.当代中国女性参政：实践与思考[D].山西大学,马克思主义理论与思想政治教育,2004,硕士.
[9]刘青.北京市基层民政执法存在问题及对策[D].中国社会科学院研究生院,法律,2014,硕士.
[10]张帆.基于可拓实例推理的起重机械装配序列规划系统研究[D].浙江工业大学,机械制造及其自动化,2012,硕士.
[11]段虹伶.镜面效果在空间设计中的体现及应用[D].湖南师范大学,设计艺术学,2013,硕士.
[12]陈峰.二级处理出水灌溉对PAHs污染土壤的生态效应研究[D].辽宁大学,环境科学,2012,硕士.
[13]李慧.尉犁县国税局干部培训管理系统设计与实现[D].大连理工大学,软件工程（专业学位）,2013,硕士.
[14]倪士光,伍新春.学习投入:概念、测量与相关变量[J].心理研究,2011,01:81-87.
[15]潘淙.家用经济型智能电子秤中称重模块的设计与研究[D].山东大学,电子与通信工程（专业学位）,2013,硕士.
[16]徐想.北京CBD街区智能导向标识的设计研究[D].北京交通大学,2014.
[17]任杰.南水北调东线南四湖水流水质模拟技术及其应用[D].青岛理工大学,环境工程,2012,硕士.
[18]于洋.基层国土资源系统人力资源管理存在的问题及对策研究[D].中国地质大学（北京）,公共管理,2014,硕士.
[19]严华云.数据挖掘技术及其在网络环境中的应用研究[D].昆明理工大学,2003.
[20]武志飞.F公司K客户订单模式优化项目研究[D].吉林大学,项目管理,2013,硕士.
[21]相岚.保守党政府执政时期（1979-1997）英国教师政策研究[D].华东师范大学,教育史,2013,硕士.
[22]许文龙.电子政务背景下海关公务员绩效管理体系创新研究[D].华侨大学,公共管理（专业学位）,2013,硕士.
[23]郝晓丽.氯腐蚀环境混凝土结构耐久性与寿命预测[D].西安建筑科技大学,结构工程,2004,硕士.
[24]顾辰.六自由度机械臂的动态路径规划和控制研究[D].江苏科技大学,控制理论与控制工程,2014,硕士.
[25]杨国辉.直流偏磁条件下变压器铁心振动及噪声研究[D].沈阳工业大学,电机与电器,2013,硕士.
[26]王艳.数据挖掘在数字图书馆中的应用[J].情报科学,2003,02:211-214.
[27]黄丽君.雄烯二酮产生菌的诱变选育及发酵条件优化的研究[D].合肥工业大学,生物化工,2013,硕士.
[28]郭小龙.论商标的合理使用[D].黑龙江大学,法律,2013,硕士.
[29]荆德龙.新疆西天山尼新塔格铁矿床地质特征与矿床成因[D].长安大学,矿物学、岩石学、矿床学,2014,硕士.
[30]薛玉芹.结核分枝杆菌CFP10基因密码子优化DNA疫苗的构建及免疫效应的评价[D].蚌埠医学院,病原生物学,2013,硕士.
[31]张建发.基于GIS的物流配送选址规划研究[D].湖南科技大学,地图学与地理信息系统,2013,硕士.
[32]罗希.与历史商榷：解读奈保尔的小说《半生》和《魔种》[D].南京师范大学,英语语言文学,2012,硕士.
[33]马伟.多床位心电监护仪设计与实现[D].西安电子科技大学,计算机应用技术,2011,硕士.
[34]张炜.无线局域网MAC技术及其QoS增强的研究[D].浙江大学,通信与信息系统,2004,硕士.
[35]傅德胜.焊接缺陷计算机自动识别模式的研究[J].控制与决策,1998,S1:85-90.
[36]李晓敏.沈阳市城区初中生户外教育实践体系构建研究[D].沈阳体育学院,体育教育训练学,2013,硕士.
[37]夏吉英.河南省高速公路少新管理处绩效考评体系研究[D].郑州大学,公共管理（专业学位）,2013,硕士.
[38]张婵娟.支持计算机协同设计的工作流管理系统技术研究[D].武汉理工大学,机械制造及其自动化,2004,硕士.
[39]王龙金.基于价值链理论的汽车制造业成本管理系统研究[D].沈阳理工大学,会计学,2013,硕士.
[40]卢鹏林.崂山森林植物群落物种多样性的垂直分布格局及影响因素分析[D].山东大学,生态学,2013,硕士.
[41]王宇飞.基于建筑节能的粉煤灰微珠表面改性工艺、结构和性能[D].华侨大学,材料学,2013,硕士.
[42]余志和,张庆淮,邸志欣,徐锦玺,荆中书.滩海地区采集方法研究[J].石油地球物理勘探,2001,04:471-479+516.
[43]张倩.基于风险导向的A油田公司资金管理体系优化研究[D].长安大学,会计（专业学位）,2013,硕士.
[44]夏石川.BGA内部缺陷检测技术研究[D].中北大学,信号与信息处理,2014,硕士.
[45]邱振.我国产业空间转移的低碳效应研究[D].北方工业大学,数量经济学,2014,硕士.
[46]闻静.城市生态化发展下的滨水绿廊的规划初探[D].聊城大学,工业设计工程（专业学位）,2014,硕士.
[47]朱刚,马良.多目标函数优化的元胞蚂蚁算法[J].控制与决策,2007,11:1317-1320.
[48]兰林杰.100例性早熟儿童饮食因素相关性分析[D].黑龙江中医药大学,中医儿科学（专业学位）,2014,硕士.
[49]徐泽水.拓展的C-OWA算子及其在不确定多属性决策中的应用[J].系统工程理论与实践,2005,11:9-15.
[50]王浩.SBR生物反硝化的试验研究[D].西安建筑科技大学,环境工程,2004,硕士.